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一、樣品與靶向物基本要求
1. 靶向物信息（必須提供）
分子式 / 精確分子量（單同位素質(zhì)量，用于質(zhì)量數(shù)匹配）Thermo Fisher Scientific
結(jié)構(gòu)式（確認(rèn)離子化位點、碎片規(guī)律）
預(yù)期保留時間（LC 體系）或 沸點 / 熱穩(wěn)定性（GC 體系）
離子化模式：ESI±、HESI±、APCI 等（優(yōu)先提供）
2. 樣品濃度與基質(zhì)
濃度范圍：常規(guī) 0.1 μg/mL～10 μg/mL；痕量可低至 ng/mL 級，最高不超 10 μg/mL（防污染 / 過載）
樣品量：液體≥0.5 mL（內(nèi)襯管可少至 50 μL）；固體≥20 mg（純品 / 提取物）
基質(zhì)要求：
無非揮發(fā)性鹽（磷酸鹽、硼酸鹽、檸檬酸鹽）、表面活性劑、高濃度 DMSO/DMF/THF（強離子抑制 + 儀器污染）
液體需透明均一，過 0.22 μm 濾膜；pH 中性 / 弱酸堿（避免強腐蝕）
3. 溶劑兼容性（MS 級）
? 推薦：甲醇、乙腈、水、甲酸（0.1%）、乙酸、氨水（≤0.5%）
? 禁止：無機強酸（HCl/H?SO?）、強堿、磷酸鹽緩沖液、高鹽、表面活性劑
二、儀器與方法學(xué)關(guān)鍵參數(shù)（靶向測試）
1. 質(zhì)量精度與分辨率（核心）
質(zhì)量精度：外標(biāo)校準(zhǔn) ≤3 ppm；內(nèi)標(biāo)（鎖峰）≤1 ppm（24 h 穩(wěn)定）Thermo Fisher Scientific
分辨率（FWHM）：
一級（Full Scan）：70,000～120,000 @ m/z 200
二級（MS2/PRM）：17,500～35,000 @ m/z 200
質(zhì)量范圍：m/z 50～6000（覆蓋小分子～多肽）
2. 離子源條件（以 HESI/ESI 為例）
源溫：ESI 250～350℃；HESI 300～400℃
噴霧電壓：正離子 +2.8～+3.5 kV；負(fù)離子 -2.5～-3.0 kV
鞘氣 / 輔助氣：N?（純度≥99.999%），鞘氣 30～50 arb，輔助氣 5～15 arb
3. 掃描模式（靶向）
PRM（平行反應(yīng)監(jiān)測）：高靈敏、高特異，適合已知靶向物定量；需確定母離子→子離子對及碰撞能量（HCD）Thermo Fisher Scientific
Full Scan + 精確質(zhì)量提?。╔IC）：適合多靶標(biāo)同時篩查，提取窗口 ±5 ppmThermo Fisher Scientific
SIM（選擇離子監(jiān)測）：超痕量（pg/mL 級），但僅一級，無結(jié)構(gòu)確證Thermo Fisher Scientific
三、定性與定量確證標(biāo)準(zhǔn)（必須滿足）
1. 定性（靶向物鑒定）
精確質(zhì)量匹配：實測 m/z 與理論值偏差 ≤3 ppm（內(nèi)標(biāo) ≤1 ppm）Thermo Fisher Scientific
同位素分布匹配：同位素峰形、豐度比與理論值相似度≥90%
二級碎片匹配：特征碎片離子（≥2 個）的 m/z 與標(biāo)準(zhǔn)品 / 數(shù)據(jù)庫一致，相對豐度比符合
保留時間匹配：與標(biāo)準(zhǔn)品 RT 偏差 ≤0.1 min（LC 體系）
2. 定量（靶向物含量）
校準(zhǔn)曲線：r2≥0.995，5～7 個濃度點（含零點）
內(nèi)標(biāo)要求：優(yōu)先同位素標(biāo)記內(nèi)標(biāo)（如 13C/1?N），校正基質(zhì)效應(yīng)與儀器波動
精密度：RSD ≤15%（低濃度 ≤20%）
準(zhǔn)確度：回收率 85%～115%（痕量 70%～130%）Thermo Fisher Scientific
四、送樣與操作禁忌
必須提供：靶向物標(biāo)準(zhǔn)品（≥1 mg）（用于校準(zhǔn)、RT 確認(rèn)、碎片庫建立）
禁止：
含高鹽 / 非揮發(fā)性緩沖液樣品（直接進樣）
DMSO、DMF、THF 純?nèi)軇┗蚋弑壤?gt;10%）
強酸堿、表面活性劑、聚合物
樣品保存：4℃冷藏（≤24 h）或 -20℃冷凍（長期），避免反復(fù)凍融
五、常見靶向物類型適配要點
小分子（農(nóng)殘 / 獸藥 / 藥物）：ESI±、PRM、分辨率 70k/17.5k，濃度 0.1～10 μg/mL
代謝物（生物樣本）：HESI、Full Scan+XIC、內(nèi)標(biāo)定量，濃度 ng/mL～μg/mLThermo Fisher Scientific
多肽 / 蛋白：ESI+、分辨率 120k/35k、m/z 600～2000，濃度 1～5 μg/mLThermo Fisher Scientific
